Исследование для выявления предрасположенности к заболеваниям из группы серонегативных спондилоартритов, в ходе которого с помощью метода проточной цитометрии определяется антиген HLA-B27.
- Человеческий лейкоцитарный антиген B27
- Иммуногенетический маркер HLA-B27
- Дифференциальная диагностика аутоиммунных заболеваний
Синонимы английские
- HLA typing, flow cytometry (flow cytofluorometry)
- Ankylosing spondylitis Histocompatibility Antigen
- Ankylosing spondylitis Human Leukocyte Antigen
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
- Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
- Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
- Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Антиген HLA-B27 – это специфический белок, обнаруживаемый на поверхности иммунных клеток. Он относится к белкам главного комплекса гистосовместимости человека, который обеспечивает различные иммунные реакции. Носительство антигена HLA-B27 ассоциировано с повышенным риском развития заболеваний из группы серонегативных спондилоартритов. Так, этот антиген может быть выявлен у 90-95% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом (болезнь Бехтерева), 75% пациентов с реактивным артритом (синдром Рейтера), 50-60% пациентов с псориатической артропатией, 80-90% пациентов с ювенильным анкилозирующим спондилоартритом и 60-90% пациентов с энтеропатическим артритом. Наличие антигена HLA-B27 у пациентов с другими заболеваниями суставов (подагра, ревматоидный артрит, септический артрит) не превышает 7-8%. Учитывая эту особенность, выявление антигена HLA-B27 имеет большое диагностическое значение в клинике ревматологических болезней.
Определение антигена HLA-B27 имеет наибольшее значение при диагностике раннего анкилозирующего спондилоартрита. В большинстве случаев между появлением первых признаков заболевания и постановкой окончательного диагноза проходит 5-10 лет. Это связано с тем, что основным диагностическим критерием заболевания являются рентгенологические признаки сакроилеита, который развивается лишь после нескольких лет воспалительного процесса в крестцово-подвздошных суставах. Пациенты с жалобами на боль в спине без радиологических признаков сакроилеита фактически в поле зрения ревматолога не попадают. Обнаружение HLA-B27 в такой ситуации может оказаться достаточным основанием для направления пациента к узконаправленному специалисту.
Определение антигена HLA-B27 показано при обследовании пациента с жалобами на боль воспалительного характера в спине при отсутствии радиологических признаков сакроилеита или при обследовании пациента с асимметричным олигоартритом.
Наличие HLA-B27 связано с повышенным риском внесуставных проявлений анкилозирующего спондилоартрита. Наибольшее значение имеют ассоциации антигена HLA-B27 и острого переднего увеита, недостаточности аортального клапана, острого лейкоза, IgA-нефропатии и псориаза. HLAB27 – позитивные пациенты более подвержены риску туберкулеза и малярии. С другой стороны, присутствие HLA-B27 играет и определенную «защитную» роль: некоторые вирусные инфекции (грипп, герпес-вирусная инфекция 2-го типа, инфекционный мононуклеоз, гепатит С и ВИЧ) протекают в более легкой форме у носителей HLA-B27.
Определение антигена HLA-B27 проводят для прогнозирования осложнений ревматоидного артрита. Наличие HLA-B27 связано с трехкратным увеличением риска атланто-аксиального подвывиха.
Для определения антигена HLA-B27 могут быть использованы различные лабораторные методы: лимфоцитотоксический тест, методы молекулярной диагностики (ПЦР), иммуноферментный анализ (ИФА) и метод проточной цитометрии. Метод проточной цитометрии является быстрым и надежным способом выявления антигена HLA-B27. При этом он имеет некоторые ограничения, которые следует учитывать при интерпретации результата. Так, моноклональные антитела к антигену HLA-B27, используемые в тесте, не являются абсолютно специфичными, но также могут реагировать и с другими антигенами семейства HLA-B(в первую очередь – HLA-B7, и в меньшей степени – HLA-B40, 73, 22, 42, 44). Учитывая эту особенность, во избежание диагностических ошибок современные протоколы определения антигена HLA-B27 используют двойные антитела, позволяющие дифференцировать антиген HLA-B27 с другими антигенами семейства HLA-B. Такой подход увеличивает специфичность и чувствительность теста до 97,6 и 98,8% соответственно.
Несмотря на наличие стойкой ассоциации атигена HLA-B27 и риска развития спондилоартритов, положительный результат теста не всегда отражает реальный риск заболевания у конкретного пациента. Это связано с тем, что антиген HLA-B27 представлен 49 различными вариантами, характеризующимися различной степенью ассоциации с этой группой заболеваний. Так, вариант HLA-B2708 имеет наибольшую ассоциацию с болезнью, а варианты HLA-B2706 и HLA-B2709, по-видимому, вовсе не связаны с риском заболевания. Около 7-8% здоровых людей европейской популяции являются носителями антигена HLA-B27. При интерпретации положительного результата могут помочь дополнительные данные о наследственности пациента.
Следует отметить, что существуют и другие, как наследственные, так и приобретенные факторы риска развития серонегативных спондилоартритов. Отсутствие HLA-B27 не противоречит диагнозу «анкилозирующий спондилоартрит». В таком случае анкилозирующий спондилоартрит классифицируется как HLAB27-негативный.
Для чего используется исследование?
- Для дифференциальной диагностики суставного синдрома (серонегативных спондилоартритов, ревматоидного и септического артрита, подагры и других);
- для скрининга, диагностики и прогноза анкилозирующего спондилоартрита;
- для оценки риска развития атлантоаксиального подвывиха при ревматоидном артрите.
Когда назначается исследование?
- При суставном синдроме: асимметричный олигоартрит, особенно в сочетании с болью в поясничной области воспалительного характера (утренняя скованность более 1 часа, улучшение при физической нагрузке, ухудшение в ночное время суток) и признаки энтезита;
- при отягощенном наследственном анамнезе по анкилозирующему спондилоартриту;
- при ревматоидном артрите.
Что означают результаты?
Наличие антигена HLA-B27:
- наблюдается у 90-95% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом и ювенильным анкилозирующим спондилоартритом, а также у 60-90% с реактивным артритом и 50% с псориатической артропатией;
- наблюдается у 7-8% здоровых людей европейской популяции.
Отсутствие антигена HLA-B27:
- наблюдается у 10% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом (HLAB27-негативный спондилоартрит);
- наблюдается у 92-93% людей европейской популяции.
- Выявление антигена HLA-B27 увеличивает риск развития какого-либо заболевания из группы спондилоартритов в 20 раз;
- отсутствие антигена HLA-B27 не противоречит диагнозу «анкилозирующий спондилоартрит».
Кто назначает исследование?
Ревматолог, хирург, врач общей практики, мануальный терапевт.
Литература
- Darke C, Coates E. One-tube HLA-B27/B2708 typing by flow cytometry using two «Anti-HLA-B27» monoclonal antibody reagents. Cytometry B Clin Cytom. 2010 Jan;78(1):21-30.
- Seo BY, Won DI.Flow cytometric human leukocyte antigen-B27 typing with stored samples for batch testing. Ann Lab Med. 2013 May;33(3):174-83.
- Seipp MT, Erali M, Wies RL, Wittwer C. HLA-B27 typing: evaluation of an allele-specific PCR melting assay and two flow cytometric antigen assays. Cytometry B Clin Cytom. 2005 Jan;63(1):10-5.
- Levering WH, Sintnicolaas K, Wind H, Hooijkaas H, Gratama JW. Flow cytometric screening for the HLA-B27 antigen on peripheral blood lymphocytes. Curr Protoc Cytom. 2005 Aug;Chapter 6:Unit6.22. doi: 10.1002/0471142956.cy0622s33.
Подписка на новости
Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed
Что такое тест HLA-B27?
Основные моменты
- Анализ крови на лейкоцитарный антиген B27 человека также известен как тест HLA-B27.
- Тест HLA-B27 используется для идентификации конкретного белка на ваших белых кровяных клетках, который может быть признаком аутоиммунного заболевания.
- Этот тест является одним из шагов в процессе диагностики потенциального аутоиммунного расстройства.
Человеческий лейкоцитарный антиген B27 (HLA-B27) представляет собой белок, расположенный на поверхности ваших лейкоцитов. Тест HLA-B27 представляет собой анализ крови, который идентифицирует белки HLA-B27.
Человеческие лейкоцитарные антигены (HLA) – это белки, обычно встречающиеся в белых кровяных телечках. Эти антигены помогают вашей иммунной системе идентифицировать различия между здоровой тканью тела и посторонними веществами, которые могут вызвать инфекцию.
Хотя большинство HLA защищают ваше тело от вреда, HLA-B27 является специфическим типом белка, который способствует дисфункции иммунной системы. Наличие HLA-B27 на ваших белых кровяных клетках может привести к тому, что ваша иммунная система начнет атаковать эти здоровые клетки. Когда это происходит, это может привести к аутоиммунным заболеваниям или иммуно-опосредованным заболеваниям, таким как ювенильный ревматоидный артрит или анкилозирующий спондилоартрит.
Почему заказ заказа?
Наблюдение за прогрессированием заболевания
Наличие HLA-B27 связано с некоторыми аутоиммунными и иммуно-опосредованными заболеваниями, включая:
- анкилозирующий спондилит, который вызывает воспаление костей в вашем позвоночнике
- реактивный артрит, который вызывает воспаление суставов, уретры и глаз, а иногда и поражений на коже
- ювенильный ревматоидный артрит
- передний увеит, который вызывает отек и раздражение в среднем слое глаза
Врач может заказать HLA -B27, чтобы контролировать прогрессирование этих и других аутоиммунных заболеваний.
Диагностика использует
Для людей со специфическими симптомами тест HLA-B27 может использоваться вместе с другими анализами крови, мочи или изображений для подтверждения диагноза аутоиммунного заболевания. Симптомы, которые могут побудить врача заказать тест, включают:
- боль в суставах
- жесткость или отек позвоночника, шеи или груди
- воспаление суставов или уретры, сопровождающееся поражениями кожи
- повторяющееся воспаление в вашем глазу
Ваш врач может заказать тесты антигена HLA, включая тесты на HLA-B27, когда вы проходите пересадку почки или костного мозга. Эти тесты могут быть использованы для обеспечения подходящего соответствия между вами и донором.
Как проходит тест?
Тест HLA-B27 включает стандартную кровь. Его обслуживает поставщик медицинских услуг в кабинете врача или в клинической лаборатории. Они обычно берут образец крови из вашей руки, используя маленькую иглу.Ваша кровь собирается в пробирке и отправляется в лабораторию для анализа.
В большинстве случаев никакой специальной подготовки не требуется. Однако поговорите со своим врачом, чтобы узнать, нужно ли вам прекратить принимать какие-либо лекарства перед кровопролитием.
Каковы риски теста?
Некоторые люди могут испытывать дискомфорт, когда их кровь нарисована. Вы можете почувствовать боль на месте прокола во время теста и легкой боли или пульсировать на месте прокола после этого.
Прохождение теста HLA-B27 сопряжено с минимальными рисками. Все анализы крови имеют следующие риски:
- трудность получения образца, что приводит к множественным иглам
- чрезмерному кровотечению на месте прокола
- обморока
- легкомысленность
- накопление крови под кожей, называемая гематомой
- инфекция на месте прокола
Реклама
Как интерпретируются результаты?
Отрицательный тест указывает на отсутствие HLA-B27 в крови.
Однако, если тест отрицательный, это не означает, что у вас нет аутоиммунного расстройства. При составлении окончательного диагноза ваш врач будет рассматривать все результаты теста вместе с вашими симптомами. Иногда люди с аутоиммунными нарушениями не имеют HLA-B27 на белых кровяных клетках.
Если тест положительный, это означает, что HLA-B27 присутствует в вашей крови. Хотя положительный результат может вызывать беспокойство, присутствие антигена не всегда означает, что будет развиваться аутоиммунное заболевание. Диагностика аутоиммунного расстройства должна производиться на основе ваших симптомов и результатов всех анализов крови и диагностических тестов.
Вынос
Анализ крови HLA-B27 является одним из шагов в диагностике потенциального аутоиммунного заболевания. Ни положительные, ни отрицательные результаты теста не должны приниматься как подтверждение того, что у вас аутоиммунное расстройство или нет. Ваш врач поговорит с вами о следующих шагах после получения результатов.
Описание
Генетическое типирование антигена HLA B27 — генетическое исследование на предрасположенность к развитию аутоиммунных заболеваний и риска развития болезни Бехтерева и других связанных серонегативных спондилоартропатий, в ходе которого с помощью ПЦР определяется аллель HLA-B27 серонегативных спондилоартропатий.
Исследование на носительство антигена тканевой совместимости HLA-В27 (гена предрасположенности к анкилозирующему спондилиту), является важным аргументом в пользу диагноза болезни Бехтерева. Считается, что появление HLA-В27 возможно более чем в 90% случаев при болезни Бехтерева и синдроме Рейтера (около 70%).
Болезнь Бехтерева (анкилозирующий спондилоартрит)
Болезнь Бехтерева (анкилозирующий спондилоартрит) — хроническое воспалительное заболевание позвоночника и суставов, которое приводит к их анкилозу (полная неподвижность сустава). Причина — генетическая предрасположенность у людей-носителей определённого антигена (HLA-В27).
Синдром Рейтера
Синдром Рейтера — ревматическое заболевание, развивающееся на фоне инфекционного поражения кишечника или мочеполовой системы и проявляющееся воспалительным поражением мочеполового тракта, суставов и глаз: «уретрит-конъюнктивит-артрит». Возникает из-за аутоиммунного процесса в результате мочеполовой или кишечной инфекции. Наиболее частой причиной синдрома является хламидиоз. Синдром Рейтера, возникающий после кишечных инфекций, вызывается иерсениями, шигеллами, сальмонеллами или другими возбудителями кишечной инфекции.
Антиген HLA-B27
Продукт гена HLA-B27 — антиген HLA-B27 — относится к молекулам главного комплекса гистосовместимости первого класса, MHC-I (MHC-major histocompatibility complex), которые участвуют в представлении пептидных антигенов для их распознавания Т-лимфоцитами. Это важно для формирования иммунного ответа на чужеродные антигены. Набор HLA антигенов уникален для каждого человека. Гены МНС I класса расположены в трех локусах (А, В и С) на коротком плече 6-ой хромосомы и отличаются высокой степенью полиморфизма. Установлено, что генетические вариации индивидуального набора этих антигенов связаны с разной восприимчивостью к различным заболеваниям.
Для гена HLA-B известно 136 аллельных вариантов. Частота встречаемости аллеля 27 локуса В (HLA-B27) варьирует в зависимости от географического региона и этнической группы; различают также субтипы HLA-B27. Cреди европейцев HLA-B27 встречается в среднем в 7–10% популяции. В то же время установлено, что его встречаемость значительно выше среди больных некоторыми заболеваниями. В 1973 году была установлена связь гена HLA-B27 с анкилозирующим спондилитом. Наличие HLA-B27 при этом заболевании выявляется почти у 90% пациентов. Вероятность развития спондилоартропатии у человека, который является носителем HLA-В27, в десятки раз выше, чем у человека без данного гена (риск развития у здоровых лиц, положительных по HLA-B27, составляет около 2%).
В настоящее время установлена связь этого гена и с другими заболеваниями. Антиген HLA-B27 выявляется у большинства лиц, заболевших серонегативными спондилоартропатиями.
Серонегативные спондилоартропатии
Серонегативные спондилоартропатии — это группа воспалительных ревматических заболеваний. К ним относится анкилозирующий спондилит (болезнь Бехтерева), псориатический артрит, реактивный артрит, синдром Рейтера, артрит при воспалительных заболеваниях кишечника, рецидивирующий увеит, ювенильный ревматоидный артрит. В клинической симптоматике всех этих заболеваний отмечается артрит периферических суставов и суставов осевого скелета, кроме того, при этих заболеваниях обычно не находят ревматоидный фактор и другие аутоантитела. Именно последний феномен позволяет назвать их «серонегативными». Совокупная встречаемость этих заболеваний в популяции составляет около 0,5%, что позволяет отнести их к часто встречающимся аутоиммунным заболеваниям.
Роль молекулы HLA-B27 в патогенезе серонегативных спондилоартропатий окончательно не установлена. Среди гипотез обсуждается роль архитектоники этой молекулы — особенностей конформационной укладки тяжёлых цепей молекул HLA-B27, возможная роль молекулярной «мимикрии» чужеродных антигенов, презентируемых HLA-B27 (ряда бактерий желудочно-кишечного или урогенитального тракта) и собственных антигенов. В частности, в качестве соответствующих инфекционных триггеров HLA-B27-зависимых реактивных артритов, подтверждается роль Salmonella, Shigella, Yersinia.
Клиническое подозрение на серонегативные спондилоартропатии у детей и взрослых требует иммуногенетического исследования наличия гена HLA B27. Этот тест не является определяющим исследованием, которое позволяет точно поставить диагноз, либо исключить его. Однако, учитывая низкую частоту встречаемости HLA-B27 в европейской популяции, его выявление у пациента при наличии клинических проявлений, соответствующих этой группе ревматических заболеваний, значительно увеличивает вероятность данного диагноза.
Показания:
- дифференциальная диагностика ранних артритов у детей и взрослых;
- диагностика анкилозирующего спондилита;
- диагностика псориатического артрита;
- диагностика реактивного артрита;
- диагностика Синдрома Рейтера;
- диагностика артритов при воспалительных заболеваниях кишечника, рецидивирующего увеита, ювенильного ревматоидного и псориатического артритов, анкилозирующего спондилита.
Подготовка
Генетическое обследование не требует специальной подготовки. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приёма пищи.
Перед диагностикой не рекомендуется подвергать себя стрессовым ситуациям, принимать спиртные напитки и курить.
Рацион и приём лекарственных препаратов не влияет на результат исследования.
Интерпретация результатов
Для интерпретации результатов генетического тестирования требуется консультация врача-генетика.